為了明確新冠病毒的宿主范圍，研究人員首先根據SARS-CoV-2的S蛋白與ACE2的結構信息，確定了5個位于結合界面上高度保守的關鍵氨基酸。以這5個氨基酸作為篩選標準，從將近300個ACE2同源序列中篩選出了80個同源序列，并發(fā)現這些可能與新冠S蛋白結合的ACE2序列均來自于哺乳動物。接下來，研究者選擇了48個有代表性的ACE2同源序列在無內源ACE2表達的人非小細胞肺癌細胞（A549）中表達，包括家畜、寵物，動物園和水族館中的動物等與人類接觸密切的物種。首先通過結合實驗評估不同物種ACE2結合S蛋白的能力，即將SARS-CoV-2的S1蛋白與過表達不同物種ACE2的A549細胞共孵育。結果發(fā)現除了三種新世界猴（白色簇絨耳狨猴、松鼠猴和簇毛捲尾猴）、考拉、鼬科動物（雪貂，水貂）的ACE2檢測不到與S1蛋白的結合之外，其余物種的ACE2與S1蛋白均有較強的結合。接下來，為了直接評估不同ACE2介導病毒進入細胞的功能，研究者用 SARS-CoV-2活病毒感染過表達ACE2的A549細胞，結果與上述結合實驗的結果一致，表達三種新世界猴子和考拉ACE2的細胞不能被病毒感染，過表達水貂和雪貂ACE2的細胞僅檢測到較少的病毒感染信號，其它物種ACE2過表達細胞中均檢測到了大量病毒感染信號（圖2）。該結果表明多個物種ACE2可能都具有介導新冠病毒進入的潛力，因此SARS-CoV-2可能具有廣泛的宿主范圍。

此外，對于三種新世界猴ACE2不能介導新冠病毒進入的現象，研究者分析了ACE2與S蛋白結合界面上的氨基酸序列。發(fā)現在新世界猴ACE2序列中這些位點保守性較低，并且新世界猴ACE2的H41和E42與其他物種ACE2高度保守的Y41和Q42不一致。研究者通過結合實驗和病毒感染實驗進一步證明了這兩個位點的重要性，將這兩個氨基酸突變?yōu)閅和Q后，使新世界猴的ACE2獲得了支持新冠病毒進入細胞的能力。