2021年5月18日, Sarepta Therapeutics展示了其在研基因療法SRP-9001的最新臨床試驗結(jié)果。SRP-9001通過將編碼微抗肌萎縮蛋白（micro-dystrophin）的轉(zhuǎn)基因遞送至肌肉組織，從而讓肌肉細(xì)胞產(chǎn)生微抗肌萎縮蛋白，治療杜氏肌營養(yǎng)不良癥（DMD）。試驗結(jié)果證明這種療法能有效升高人體內(nèi)抗肌萎縮蛋白的表達(dá)水平，且安全性與耐受性良好。

DMD是一種致命的罕見X連鎖退行性神經(jīng)肌肉疾病，也是最常見的致死性遺傳疾病之一。在全球范圍內(nèi)，每3500-5000例男嬰中就有1例DMD患者。DMD患者一般在3-5歲時開始發(fā)病，十幾歲時失去行走能力，30~40歲時由于呼吸或心力衰竭而去世。其發(fā)病機(jī)理是由于患者體內(nèi)編碼抗肌萎縮蛋白（dystrophin）的基因發(fā)生變異，導(dǎo)致抗肌萎縮蛋白的缺失或功能缺陷?？辜∥s蛋白在肌肉細(xì)胞中形成名為DAPC的蛋白復(fù)合體，DAPC可保護(hù)肌肉不在收縮過程中受損傷?？辜∥s蛋白的缺失或缺陷，會導(dǎo)致肌肉在收縮過程中出現(xiàn)慢性損傷以及炎癥發(fā)作，最終影響肌肉的再生，導(dǎo)致肌肉被瘢痕組織或者脂肪代替。目前針對DMD致病機(jī)理的療法均旨在恢復(fù)人體內(nèi)抗肌萎縮蛋白的表達(dá)水平。

基因療法SRP-9001通過將表達(dá)抗肌萎縮蛋白的轉(zhuǎn)基因包裝在AAV病毒載體中，通過轉(zhuǎn)染患者的肌肉細(xì)胞，讓肌肉生成具有部分抗肌萎縮蛋白功能的重組蛋白，可以對攜帶任何類型DMD基因變異的患者生效。理論上它可以讓患者接受一次治療之后，獲得長期持久的改善。SRP-9001使用的是從非人靈長類動物中分離出的AAVrh74病毒載體。它表達(dá)的微抗肌萎縮蛋白是一種縮短的功能性抗肌萎縮蛋白。這種療法的優(yōu)點是能夠在肌肉中引起轉(zhuǎn)基因的強(qiáng)力表達(dá)，不會穿過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。而且，較少患者體內(nèi)存在針對這一病毒載體的免疫力。

▲SRP-9001基因療法的特點（圖片來源：參考資料[2]）

正在進(jìn)行的Study 103臨床研究共入組20名年齡在4-8歲患有DMD的男童，目前公布的數(shù)據(jù)僅針對第一階段前11名患者在治療12周后的數(shù)據(jù)。試驗旨在解決4個關(guān)鍵問題：

1. 轉(zhuǎn)基因DNA是否成功遞送到肌肉細(xì)胞內(nèi)？

通過微抗肌萎縮蛋白載體基因組計數(shù)，證明SRP-9001具有穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染特性，平均每個細(xì)胞核內(nèi)載體基因拷貝數(shù)為3.87。

2. 轉(zhuǎn)基因是否表達(dá)了想要表達(dá)的目標(biāo)蛋白？

使用蛋白質(zhì)印跡法（Western blot），檢測結(jié)果顯示微抗肌萎縮蛋白表達(dá)水平平均為正常人的55.4%。

3. 表達(dá)的蛋白位于正確的位置么？

使用熒光免疫組織化學(xué)檢測，研究人員發(fā)現(xiàn)微抗肌萎縮蛋白陽性纖維的百分比達(dá)到70.5%，熒光強(qiáng)度為正常組織的116.9%。

▲SRP-9001驅(qū)動微抗肌萎縮蛋白在肌纖維表面表達(dá)（圖片來源：參考資料[2]）

4. 基因療法的安全性與耐受性如何？

安全性與先前研究一致，最常見的不良反應(yīng)為嘔吐，一般在第一周內(nèi)發(fā)作，癥狀輕微，通過治療緩解?；颊叩母蚊赋霈F(xiàn)短暫升高，接受類固醇治療后得到緩解，沒有出現(xiàn)患者肝功能受損。此外沒有觀察到臨床相關(guān)的補體激活，耐受性良好。

基于本次試驗的積極結(jié)果，Sarepta公司下一步計劃在2021年中與美國FDA會晤進(jìn)行討論，并且在討論結(jié)束后開展關(guān)鍵性3期臨床試驗。

參考資料:

[1] Sarepta Therapeutics to Share Expression and Safety Results from Study 103 (ENDEAVOR) Evaluating SRP-9001, its Investigational Gene Therapy for the Treatment of Duchenne Muscular Dystrophy. May 17, 2021, from https://investorrelations.sarepta.com/news-releases/news-release-details/sarepta-therapeutics-share-expression-and-safety-results-study?_ga=2.161787388.1980422535.1621350865-784075460.1620058440

[2] Study SRP-9001-103: 12-Week Expression and Safety Data Using Commercially Representative Material https://investorrelations.sarepta.com/static-files/09358a6f-98f9-4e11-a59e-db6b0d0f584f

來源：藥明康德