中間神經(jīng)元是大腦皮層中除興奮性神經(jīng)元之外的另一類重要的神經(jīng)元，通過釋放GABA調(diào)節(jié)興奮性神經(jīng)元的活動。中間神經(jīng)元異常會打破神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中的興奮-抑制平衡，導(dǎo)致癲癇、自閉癥、精神分裂等神經(jīng)精神疾病。大腦中的中間神經(jīng)元在形態(tài)、基因表達、環(huán)路連接以及神經(jīng)電生理活動模式等方面表現(xiàn)出豐富的多樣性，而中間神經(jīng)元的多樣性是大腦能夠?qū)崿F(xiàn)復(fù)雜而精細功能的基礎(chǔ)。當(dāng)前，關(guān)于人大腦中間神經(jīng)元的多樣性如何發(fā)育及其基因調(diào)控機制的研究較為有限。因此，中間神經(jīng)元的起源及其多樣性的發(fā)育機制研究是神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的核心科學(xué)問題之一。

12月10日，中國科學(xué)院生物物理研究所研究員王曉群、北京師范大學(xué)教授吳倩，聯(lián)合英國倫敦國王學(xué)院教授Oscar Marin，在Science上發(fā)表了題為Mouse and human share conserved transcriptional programs for interneuron development的研究論文，系統(tǒng)剖析了人腦中間神經(jīng)元的起源、譜系發(fā)育及其多樣性的分化調(diào)控機制，并通過與小鼠中間神經(jīng)元的發(fā)育機制比較研究揭示了中間神經(jīng)元發(fā)育過程的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制在進化上的保守性與特異性。

大量研究證實，中間神經(jīng)元起源于位于腹側(cè)端腦的神經(jīng)節(jié)隆起（GE，ganglionic eminence）。神經(jīng)節(jié)隆起根據(jù)解剖位置的不同，可分為內(nèi)側(cè)（MGE）、外側(cè)（LGE）和尾側(cè)神經(jīng)節(jié)隆起（CGE）。本研究中，科研人員收集了人類妊娠期9-18孕周的神經(jīng)節(jié)隆起樣品，探究了人腦中神經(jīng)節(jié)隆起產(chǎn)生的神經(jīng)元的多樣性，闡釋了不同神經(jīng)元譜系的發(fā)育軌跡及其多樣性形成的分子調(diào)控機制。該研究首先基于細胞類型特征基因的表達情況，區(qū)分出神經(jīng)節(jié)隆起中的神經(jīng)祖細胞及分裂后的神經(jīng)元，而后者基于基因表達差異又可進一步區(qū)分為MGE、LGE及CGE細胞?；诖?，本研究確定了區(qū)分神經(jīng)節(jié)隆起中神經(jīng)祖細胞及分裂后神經(jīng)元，以及區(qū)分MGE、LGE及CGE細胞的特征性基因表達。

與皮層中的神經(jīng)祖細胞類似，腹側(cè)端腦GE中的神經(jīng)祖細胞包括放射狀膠質(zhì)細胞（RGCs）及中間神經(jīng)元祖細胞（IPCs）。研究綜合轉(zhuǎn)錄組分析及實驗驗證揭示了人腦GE中RGC和IPC細胞的多樣性及空間分布特征，并進一步探索了GE中的神經(jīng)祖細胞區(qū)域化特征及其多樣性形成的分子機制。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，RGC主要集中于VZ區(qū)域，而豐富的IPC細胞則分布于擴大的SVZ區(qū)域，說明人腦神經(jīng)節(jié)隆起SVZ區(qū)域的擴大是由于IPCs而非RGCs數(shù)量的大量增加而導(dǎo)致，這與皮層擴大的機制不同。

嚙齒類研究顯示，MGE、LGE和CGE分別產(chǎn)生分布于不同腦區(qū)的不同種類的神經(jīng)元。然而，關(guān)于人腦中神經(jīng)節(jié)隆起產(chǎn)生的神經(jīng)元類型的多樣性，以及不同神經(jīng)元類型的發(fā)育譜系及其調(diào)控機制，尚不清楚。為了回答這一問題，科研人員解析了MGE及LGE細胞的多樣性、發(fā)育潛能、不同神經(jīng)元譜系的發(fā)育軌跡及其分子調(diào)控機制。研究聯(lián)合分析分裂后的MGE及LGE細胞與各自的神經(jīng)祖細胞，繪制出人腦中MGE及LGE起源的不同神經(jīng)元譜系的發(fā)育軌跡。研究表明，人腦中的MGE細胞主要分化為皮層及海馬中的中間神經(jīng)元及皮層下腦區(qū)的GABA能及膽堿能神經(jīng)元，以及小一群特異性表達CRABP1及NKX2-1的神經(jīng)元；而與嚙齒類類似，LGE則向嗅球中間神經(jīng)元及紋狀體投射神經(jīng)元方向分化，而后者又可進一步細分為2種D1和1種D2多棘投射神經(jīng)元，分別參與紋狀體直接通路及間接通路。

種類多樣性是中間神經(jīng)元最顯著的特征之一。而關(guān)于人腦中間神經(jīng)元多樣性產(chǎn)生的時間和空間信息尚不清晰。目前，關(guān)于中間神經(jīng)元的多樣性在發(fā)育初期處于前體細胞狀態(tài)時已確定，還是遷移并進入最終的腦區(qū)位置后受微環(huán)境的影響才逐漸建立，尚不明確。本研究中，科研人員整合分析了胚胎期的MGE細胞與成體皮層中的LHX6+成熟中間神經(jīng)元的單細胞測序數(shù)據(jù)，闡明了MGE中間神經(jīng)元的多樣性在其在神經(jīng)節(jié)隆起產(chǎn)生的初期仍處于前體細胞狀態(tài)時便已確定。中間神經(jīng)元在腹側(cè)端腦的神經(jīng)節(jié)隆起產(chǎn)生之后，需要進入不同的遷移路徑，進而精準地進入目標(biāo)腦區(qū)并參與其環(huán)路建立。而中間神經(jīng)元多樣性的提前確定，對于指導(dǎo)中間神經(jīng)元準確地進入遷移路徑從而精準地參與環(huán)路建立是頗為重要。

2018年，Mi等（Science，2018）和Mayer等（Nature，2018），探究了小鼠胚胎發(fā)育期中間神經(jīng)元多樣性的形成機制。本研究解析的調(diào)控人腦中間神經(jīng)元發(fā)育的基因調(diào)控機制與Mi和Mayer等報道的小鼠中間神經(jīng)元的調(diào)控機制呈現(xiàn)出高度的相似性。盡管中間神經(jīng)元的發(fā)育調(diào)控機制在進化上呈現(xiàn)出高度的保守性，但研究證實，與嚙齒類比較，人腦中的中間神經(jīng)元在數(shù)量及類別上均呈現(xiàn)出更大的豐富性，而人腦中間神經(jīng)元豐富的多樣性推動了腦功能的復(fù)雜化及高級認知情感的形成。那么，在胚胎發(fā)育期，是否可以在神經(jīng)節(jié)隆起中找到在人腦中特異性存在的中間神經(jīng)元前體細胞類型？為了回答這一問題，本研究將人及小鼠的神經(jīng)節(jié)隆起中的中間神經(jīng)元前體細胞的單細胞轉(zhuǎn)錄組測序數(shù)據(jù)進行整合比較并展開生物學(xué)驗證，發(fā)現(xiàn)了MGE起源的CRABP1+NKX2-1+，以及CGE起源的SCGN+CALB2+兩種在人腦中特異性存在的中間神經(jīng)元前體細胞類型。此外，這兩種神經(jīng)元在發(fā)育過程中存在，并在成年人的大腦皮層中檢測到這些神經(jīng)元。

該研究闡釋了人腦中間神經(jīng)元的發(fā)育規(guī)律及其多樣性形成的分子調(diào)控機制，論述了人腦中間神經(jīng)元的多樣性是提前確定的以及中間神經(jīng)元發(fā)育調(diào)控機制在進化上的保守性。此外，研究還發(fā)現(xiàn)了人腦中特異性存在的中間神經(jīng)元前體細胞類型，揭示了人腦中間神經(jīng)元相較于其他物種的豐富性及多樣性，這或是人類在進化中能夠脫穎而出并擁有豐富的情感和自我認知的基礎(chǔ)，并為探索自閉癥及精神分裂癥等中間神經(jīng)元異常疾病的病理機制及新的治療方法奠定了重要基礎(chǔ)。

研究工作得到國家重點研發(fā)計劃、中科院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項、國家自然科學(xué)基金等的支持。

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人腦神經(jīng)節(jié)隆起產(chǎn)生的神經(jīng)元多樣性及不同神經(jīng)元的發(fā)育軌跡