“石女”，這個在中國古代諱莫如深的詞語，直到現(xiàn)在依然在民間沿用，人們將不能行經(jīng)、不能生育的女性俗稱為“石女”。

“實際上，這在醫(yī)學里屬于女性生殖道畸形的一種，女性生殖道畸形是一組先天性疾病，人群的總體發(fā)病率約為4%~7%。”北京協(xié)和醫(yī)院婦產科主任朱蘭說。

女性生殖道畸形是指女性生殖器官在分化過程中，受到內源性因素或外源性因素的影響，內生殖器始基的融合、管腔化和發(fā)育以及外生殖器的衍變發(fā)生改變，導致各種發(fā)育異常。該病種類復雜，多因青春期后原發(fā)閉經(jīng)、經(jīng)血梗阻引起下腹部疼痛、感染等癥狀，或生育年齡的不良妊娠結局而被發(fā)現(xiàn)，臨床表現(xiàn)多樣，畸形復雜者診斷、治療均較為延后，因而對患者身心健康及生育能力影響較大。

“其中，MRKH綜合征（先天性無子宮無陰道，MRKHS）、陰道斜隔綜合征（HWWS）、陰道閉鎖是三類臨床癥狀重、易誤診誤治的女性下生殖道畸形疾病，也是影響家庭和社會的重要民生問題?！敝焯m說。

朱蘭（受訪者供圖）

發(fā)現(xiàn)MRKHS新致病基因突變

2015年起，朱蘭開始在全國牽頭建立中國下生殖道畸形合作網(wǎng)絡，并于2020年11月牽頭成立中國醫(yī)師協(xié)會婦產科醫(yī)師分會女性生殖道畸形學組。因該類疾病診治集中的特點，該學組基本覆蓋中國80%的女性下生殖道畸形患者。

該學組制定了統(tǒng)一標準收集MRKHS、HWWS、陰道閉鎖三類女性下生殖道畸形患者的臨床資料，并上傳至中國女性生殖器官畸形篩查登記平臺。此外，還收集了患者及部分患者父母的外周靜脈血DNA樣本，儲存于北京協(xié)和醫(yī)院生物樣本中心。

“目前，該登記平臺包括1416例MRKHS、156例HWWS和262例陰道閉鎖患者的完整臨床數(shù)據(jù)，標本庫中包括1190例MRKH散發(fā)患者、226個MRKH核心家系，115例斜隔綜合征散發(fā)患者、40個斜隔綜合征核心家系及187例陰道閉鎖散發(fā)患者、75個陰道閉鎖核心家系的外周靜脈血DNA標本。”朱蘭介紹道。

據(jù)悉，該標本庫是目前世界范圍內最大的包括部分高品質核心家系樣本的女性下生殖道畸形臨床資料庫和生物標本庫，不僅能提供疾病相關的全局信息數(shù)據(jù)，還能提供疾病相關的生物大分子整體信息，為尋找關鍵致病基因提供依據(jù)。

在此基礎上，朱蘭團隊與世界多中心科學家密切合作，納入了來自中國、美國、希臘、法國、巴西、瑞士等7個中心共592例MRKHS患者，報道了目前全球最大的MRKHS研究隊列。

通過該隊列全外顯子組測序的數(shù)據(jù)分析，朱蘭團隊發(fā)現(xiàn)PAX8、BMP4和BMP7為MRKHS患者新發(fā)致病基因突變，該成果發(fā)表于美國人類遺傳學官方雜志。同時，他們進一步利用多項體外功能實驗，探索MRKH隊列中TBX6的生物學效應，觀察到在攜帶有害變體的家庭內部存在不一致的表現(xiàn)率，提示MRKHS的遺傳機制較經(jīng)典的孟德爾遺傳更復雜，明確了TBX6基因突變與MRKHS的關聯(lián)，此外也提示攜帶TBX6突變的MRKHS患者應更關注是否合并脊柱畸形的問題。

基于前期PAX8基因及TBX6基因的系列研究，朱蘭團隊獲得了五項MRKHS早期診斷標記物的發(fā)明專利。另外，由朱蘭主持研發(fā)的女性生殖道畸形早期分子診斷標志物試劑盒，極大地降低了女性生殖道畸形患者分子診斷的時間成本，并減輕了其經(jīng)濟負擔，有助于實現(xiàn)中國女性生殖道畸形患者的“早篩”、“早診”和“早治”，為該類疾病患者救治提供精準治療方案。

患者卵巢儲備功能或過早下降

朱蘭表示，現(xiàn)有文獻提示，MRKHS患者性激素水平正常，第二性征按時發(fā)育。由于MRKHS是由苗勒氏管發(fā)育異常導致，而卵巢并非苗勒氏管來源，因此通常認為該類患者卵巢發(fā)育是正常的，但結果仍存在爭議?！澳壳埃嘘P患者卵巢儲備功能的資料報道較少，卵巢的形態(tài)學和組織學研究未見報道，部分研究指出MRKHS可能由性索間質腫瘤導致?！?/p>

于是，朱蘭團隊前期對國內12例（年齡16至25歲）MRKHS患者進行了卵巢活檢，通過組織學和病理學評估其卵巢儲備功能。通過全面免疫組化染色分析，他們發(fā)現(xiàn)MRKHS患者常可見閉鎖卵泡，直徑一般為1mm。2例年輕患者髓質區(qū)域的增生，類似于絕經(jīng)期卵巢的特征。通過3D建模系統(tǒng)，他們統(tǒng)計了12例卵巢活檢連續(xù)完整切片的患者的始基卵泡密度，發(fā)現(xiàn)原始卵泡密度與年齡呈顯著負相關。

“據(jù)此，我們認為MRKHS患者有卵巢儲備功能過早下降的可能，有必要在臨床中為MRKHS患者開展生育力保存工作?！敝焯m說。

提出生殖道治療新術式

“MRKHS的陰道重建是公認的醫(yī)學難題之一?！敝焯m指出，理想重建后陰道應接近正常的足夠的深度和寬度、不需要持續(xù)擴張，柔軟、潤滑、有彈性、不發(fā)生攣縮，功能和外觀均滿意，個人能輕松日常護理。但目前傳統(tǒng)的皮片法和皮瓣法陰道成形術產生的身體疤痕影響美觀，腸道代陰道成形術不僅費用昂貴，而且有術后易損傷出血，易感染HIV、梅毒等性病的隱患。

為彌補傳統(tǒng)術式的不足，朱蘭團隊在國內首次構建了小型豬體內陰道重建模型及組織學和功能學評價體系，創(chuàng)建了具有自主知識產權的生物補片法人工陰道成形術。前期，他們將人臍帶間充質干細胞種植在豬小腸黏膜下基質補片上，探討補片對干細胞的增殖能力、分化潛能和分泌能力的影響，并首次創(chuàng)新性開發(fā)出基于間充質干細胞的生物工程補片，首次在非人靈長類動物中進行組織修復作用的驗證，為女性生殖道發(fā)育異常患者的治療提供了新思路和臨床應用轉化價值。

“美國著名再生醫(yī)學專家、世界技術獎得主Atala教授在《柳葉刀》上肯定了我們提出的‘上皮細胞種植于生物支架再生陰道可行性’?！敝焯m表示，對比其他陰道成形術式，生物補片法人工陰道成形新術式?jīng)]有體表切口，保護隱私，手術時間短，靜脈麻醉即可實行。術后陰道功能評價在性欲、性喚起、濕潤感、性高潮、性生活滿意度、疼痛六個維度與正常對照組比較均沒有統(tǒng)計學差異。

目前，該新術式已寫入《女性生殖器官畸形診治的中國專家共識》，并在國內數(shù)百家醫(yī)院推廣應用。近三年全國先天性無陰道MRKHS病案手術統(tǒng)計顯示，采用生物補片陰道成形術式的病例已占41%。“很高興該術式得到了國內外同行的廣泛認可?！敝焯m說。

來源：中國科學報